Tarea No. 6

Frotis

Un frotis de sangre es un proceso científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente.

Es más adecuado emplear sangre que aun no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre).

Su realización es de vital importancia para obtener una orientación de:

1. La valoración de la estimulación eritropoyetica.
2. Las anomalías en la maduración nuclear y citoplásmica de las células hemáticas.
3. Los trastornos en la arquitectura de las células al formarse en la médula osea.
4. Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifica de algunas enfermedades.
5. Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia.
6. La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre.

La fidelidad de la información obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las extensiones. Estas no deben ser demasiado gruesas porque las células se amontonarían y no podrían ser reconocidas, ni diferenciarse, ni demasiado delgadas porque las células se deformarían, distorsionarían y destruirían. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:

1. Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (prefentemente nuevos).
2. La gota de sangre usada para la preparación de el frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia de el tamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.
3. La sangre no haya estado en contacto con anticoagulante, pues podría deformarse la morfología celular si pasase esto.
4. La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".

Preparación del frotis

Los estudiantes, a partir de colonias aisladas de Escherichia coli DH5α, realizan un frotis en portaobjeto (extensión, secado y fijación) y, proceden a realizar una tinción simple con un colorante básico:

 

Preparación de frotis microbiano a partir de cultivo en caldo y decultivo sólido

Se fija el frotis flameando suavemente el portaobjetos por la llama del mechero

Se cubre el frotis con la solución colorante

Lavar el preparado con agua destilada o corriente

Secar suavemente el preparado con papel absorbente

Se observa al microscopio enfocando, inicialmente el preparado con el lente de aumento menor, hasta llegar al objetivo de inmersión. Dibujan lo observado y registran la forma de la célula yel tipo de agrupación que ésta presenta.